Transcription

VALIDASI METODE PENETAPAN KADAR DEKSAMETASONMENGGUNAKAN KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI DANAPLIKASINYA PADA OBAT TRADISIONAL PEGAL LINUSKRIPSIOleh :Muhamad Barik Ulfa Faza135010933FAKULTAS FARMASIUNIVERSITAS WAHID HASYIMSEMARANG2017

VALIDASI METODE PENETAPAN KADAR DEKSAMETASONMENGGUNAKAN KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI DANAPLIKASINYA PADA OBAT TRADISIONAL PEGAL LINUSKRIPSIdiajukan untuk memenuhi salah satu syaratdalam mencapai derajat Sarjana FarmasiProgram Studi Ilmu Farmasi pada Fakultas FarmasiUniversitas Wahid HasyimSemarangOleh :Muhamad Barik Ulfa Faza135010933FAKULTAS FARMASIUNIVERSITAS WAHID HASYIMSEMARANG2017i

SURAT PERNYATAANYang bertandatangan di bawah ini :Nama: Muhamad Barik Ulfa FazaNIM: 135010933Judul Skripsi: n Kromatografi Cair Kinerja Tinggi danAplikasinya pada Obat Tradisional Pegal Linu.Menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah diajukanuntuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi dan sepanjangpengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atauditerbitkan oleh orang lain kecuali yang secara tertulis digunakan sebagai acuandalam naskah dan disebutkan dalam pustaka.Demikian surat pernyataan ini saya buat dengan sebenar-benarnya dan dapatdigunakan sebagaimana mestinya.Semarang, 9 Juni 2017Muhamad Barik Ulfa Fazaiii

HALAMAN PERSEMBAHANBerangkat dengan penuh keyakinanBerjalan dengan penuh keikhlasanIngat hanya pada Allah apapun dan di manapun kita berada kepada Dialah tempat meminta dan memohon.“Sesungguhnya bersama kesulitan ada kemudahan, maka apabila engkautelah selesai (dari suatu urusan), tetaplah bekerja keras (untuk urusanyang lain), dan hanya kepada Tuhanmulah engkau berharap.(Q.S Al-Insyirah : 6-8)Karya ilmiah ini kupersembahkan kepada:Bapak dan ibuku tercinta atas kasih sayang, doa dan semangatnya yang tiada hentiuntukku serta almamaterku sebagai wujud terima kasihiv

KATA PENGANTARPuji syukur penulis panjatkan ke hadirat Allah SWT, yang telahmelimpahkan rahmat dan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikanpenelitian dan penulisan skripsi yang berjudul “Validasi Metode PenetapanKadar Deksametason Menggunakan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi danAplikasinya pada Obat Tradisional Pegal Linu”. Skripsi ini disusun untukmemenuhi salah satu syarat dalam memperoleh derajat Sarjana Farmasi FakultasFarmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang.Melalui tulisan ini dengan segala ketulusan hati penulis menyampaikanrasa terimakasih sebesar-besarnya kepada :1. Ibu Aqnes Budiarti, S.F., M.Sc., Apt selaku Dekan Fakultas FarmasiUniversitas Wahid Hasyim Semarang dan pembimbing yang telah bersediameluangkan waktu, tenaga serta pikiran untuk memberikan bimbingan danpengarahan dalam penyusunan skripsi ini.2. Bapak Dr. Sumantri, M.Sc., Apt dan bapak Drs.H. Ibrahim Arifin, M.Sc., Aptselaku penguji skripsi atas saran, masukan dan koreksi terhadap skripsi ini.3. Seluruh dosen Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang yangtelah memberikan bekal ilmu pengetahuan sebagai dasar penulisan skripsi ini.4. Kepala dan staf Laboratorium Kimia Farmasi Fakultas Farmasi UniversitasWahid Hasyim Semarang yang telah membantu pelaksanaan penelitian ini.5. PT. Phapros yang telah memberikan bantuan bahan untuk penelitian ini.v

6. Sugito Chandra, S.Farm., dan Danang Novianto Wibowo, S.Farm., Apt., yangtelah banyak membantu dalam proses pelaksanaan penelitian.7. Agus Suharyono satu- satunya rekan dalam proses peneitian maupun prosespenyusunan skripsi ini.8. Semua pihak yang telah membantu penelitian dan penyusunan skripsi ini.Semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi masyarakat, bagiperkembangan ilmu kefarmasian pada khususnya dan ilmu pengetahuan padaumumnya. Amin.Semarang, 9 Juni 2017Muhamad Barik Ulfa Fazavi

DAFTAR ISIPENGESAHAN SKRIPSI . iiSURAT PERNYATAAN . iiiHALAMAN PERSEMBAHAN . ivKATA PENGANTAR . vDAFTAR ISI . viiDAFTAR TABEL . xDAFTAR GAMBAR .xiDAFTAR LAMPIRAN . xiiINTISARI . xiiiABSTRACT . xivBAB I. PENDAHULUAN . 1A. Latar Belakang . 1B. Perumusan Masalah . 2C. Tujuan Penelitian . 3D. Manfaat Penelitian . 3E. Tinjauan Pustaka . 31. Deksametason . 32. Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) . 53. Validasi . 8a. Presisi . 9b. Akurasi . 9c. Selektivitas . 10vii

d. Linieritas . 10e. Sensitivitas. 114. Obat Tradisional . 11F.Landasan Teori . 12G. Hipotesis . 13BAB II. METODE PENELITIAN. 14A. Alat Dan Bahan Penelitian . 141. Bahan . 142. Alat . 14B. Jalannya Penelitian . 141. Pembuatan Larutan Stok Deksametason . 142. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum . 153. Optimasi Komposisi Fase Gerak . 154. Pembuatan Kurva Baku . 155. Validasi . 16a. Uji Presisi . 16b. Uji Akurasi . 16c. Uji Selektivitas . 17d. Uji Linieritas . 17e. Uji Sensitivitas. 186. Penetapan Kadar Deksametason dalam Obat Tradisional . 19C. Skema Jalannya Penelitian . 20viii

BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN . 21A. Optimasi Panjang Gelombang Maksimum Deksametason . 21B. Optimasi Komposisi Fase Gerak . 22C. Pembuatan Kurva Baku Deksametason . 25D. Validasi Metode Analisis . 261. Presisi . 262. Akurasi . 273. Selektivitas . 294. Linieritas . 305. Sensitivitas . 32E. Penetapan kadar deksametason dalam sediaan obat tradisional . 33BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN . 35A. Kesimpulan . 35B. Saran . 34DAFTAR PUSTAKA . 36LAMPIRAN . 38ix

DAFTAR TABELTabel I.Hasil optimasi komposisi fase gerak . 25Tabel II.Hasil kurva baku deksametason secara KCKT . 25Tabel III. Hasil uji presisi deksametason . 27Tabel IV. Hasil uji akurasi deksametason pada obat tradisional dengan metodepenambahan bahan baku . 28Tabel V.Hasil linieritas deksametason secara KCKT . 31Tabel VI. Hasil uji penetapan kadar deksametasondalam sediaan obattradisional pegal linu. . 33x

DAFTAR GAMBARGambar 1.Struktur Kimia Deksametason . 4Gambar 2.Skema Komponen KCKT . 5Gambar 3.Skema jalannya penelitian . 20Gambar 4.Hasil Scanning Optimasi Panjang Gelombang Deksametason . 22Gambar 5.Kromatogram hasil optimasi komposisi fase gerak . 24Gambar 6.Grafik hasil kurva baku deksametason . 26Gambar 7.Kromatogramdeksametason dalam sediaan obat tradisionalpegal linu dengan fase gerak asetonitril dan 0,1% asam ortofosfat(70:30 v/v) dengan laju alir 1 mL/menit . 30Gambar 8.Hubungan linier konsentrasi deksametason terhadap luas area . 32xi

DAFTAR LAMPIRANLampiran 1. Contoh Kromatogram Kurva Baku Deksametason . 38Lampiran 2. Contoh Kromatogram Sampel Deksametason Replikasi 6 kali . 40Lampiran 3. Contoh Perhitungan Perolehan Kembali Deksametason dengan . 42Lampiran 4. Perhitungan LOD dan LOQ Deksametason . 44Lampiran 5. Contoh Perhitungan Kadar Deksametason dalam sediaan Obat . 47Lampiran 6. Dokumentasi Penelitian . 48Lampiran 7. Certificate of Analysis Deksametason . 49Lampiran 8. Surat Keterangan Penelitian . 49xii

INTISARIDeksametason merupakan bahan kimia obat yang seringkali ditambahkansecara ilegal pada obat tradisional pegal linu sehingga dapat membahayakankesehatan. Dengan demikian perlu dilakukan analisis penetapan kadar bahankimia obat dalam obat tradisional menggunakan metode yang tepat, teliti, selektifdan sensitif untuk memastikan keamanan obat tradisional. Tujuan penelitian iniadalah melakukan validasi metode penetapan kadar deksametason menggunakankromatografi cair kinerja tinggi (KCKT) dan mengaplikasikannya pada obattradisional pegal linu yang ditambah deksametason.Penetapan kadar deksametason menggunakan seperangkat metode KCKT(Jazco) yang dilengkapi dengan detektor UV-Vis pada panjang gelombang 242,5nm. Fase diam yang digunakan yaitu C18 serta fase gerak berupa campuranasetonitril dan 0,1% asam ortofosfat (70:30, v/v) dengan laju alir 1 mL/menit. Ujivalidasi yang dilakukan meliputi uji presisi, akurasi, selektivitas, linieritas dansensitivitas.Hasil penelitian menunjukkan bahwa uji validasi memenuhi persyaratan.Nilai-nilai parameter validasi yang diperoleh deksametason secara berturut- turutyaitu : uji presisi menghasilkan %RSD 0,321%, uji akurasi sebesar 100,189% 100,804%, selektivitas yang baik, linieritas dengan nilai korelasinya (r) 0,999,sedangkan LOD sebesar 0,926 μg/mL dan LOQ sebesar 3,086 µg/mL. Kadar ratarata deksametason dalam obat tradisional pegal linu adalah 100,185%. Hasil inimenunjukkan bahwa penetapan kadar deksametason dalam obat tradisional pegallinu dapat diaplikasikan dengan baik.Kata Kunci : Validasi, deksametason, obat tradisional pegal linu, KCKTxiii

ABSTRACTDexamethasone is a chemical drug that is often added illegally ontraditional medicine stiff so it can be harmful to health. Thus the need to analyzethe chemical assay of the drug in traditional medicine using an accuracy,precision, selectivity and sensitivity to ensure the safety of traditional medicines.The purpose of this study was to validate the assay method dexamethasone usinghigh performance liquid chromatography (HPLC) and applying traditionalmedicine dexamethasone stiff add.Determination of dexamethasone was performed using HPLC (Jazco)method equipped with UV-Vis detector at a wavelength of 242,5 nm. Thestationary phase used is C18 and the mobile phase is a mixture of acetonitrile and0,1% orthophosphoric acid (70:30, v/v) with a flow rate of 1 mL/min. Validationtest was conducted on the test of precision, accuracy, selectivity, linearity andsensitivity.The results showed that the validation test meets the requirements.Parameter validation values obtained dexamethasone respectively, that is:precision test generates % RSD 0,321%, accuracy test of 100,189%- 100,804%,good selectivity, linearity with the correlation (r ) 0,999, while the LOD of0,926 mg/mL and the LOQ of 3,086 mg/mL. The average levels ofdexamethasone in traditional medicine stiff is 100,185%. Below the resultsindicate the assay of dexamethasone in traditional medicine can be applied with astiff fine.Keywords: Validation, dexamethasone, traditional medicines stiff, HPLCxiv

Dexamethasone is a chemical drug that is often added illegally on traditional medicine stiff so it can be harmful to health. Thus the need to analyze the chemical assay of the drug in traditional medicine using an accuracy, precision, selectivity and s